分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

產(chǎn)品品牌:

分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程:

分子克隆的相關(guān)載體: DNA的片段的克隆需要合適的載體，載體或是質(zhì)粒，或是噬菌體，或是病毒，通常大多經(jīng)過(guò)人工改造。作為載體必須具備兩條件:-是該載體在細(xì)胞內(nèi)必須能自主復(fù)制， 即必須具備復(fù)制原點(diǎn);二是該載體必須具備適合的酶切位點(diǎn)，且這些酶切位點(diǎn)不在復(fù)制原點(diǎn)區(qū)域內(nèi)。以上兩條，保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽(yáng)隆克隆，載體上常有篩選標(biāo)記，如對(duì)抗菌素的抗性，某些基因產(chǎn)物的顯色反應(yīng)等。

服務(wù)要求:

1、請(qǐng)以郵件等形式告知我們服務(wù)的主要目的及具體要求。

2、提供外源DNA的來(lái)源及背景資料。DNA來(lái)源包括: PCR擴(kuò)增產(chǎn)物; RT - PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;從其它質(zhì)粒上酶切得到的DNA的片段等。

3、提供DNA的片段的電泳照片,并請(qǐng)標(biāo)明Marker有濃度。

4、提供載體來(lái)源與背景資料。

5、注明克隆使用的酶切位點(diǎn)以及是否需要平端連接等。

相關(guān)材料說(shuō)明:

1、對(duì)于實(shí)驗(yàn)材料中涉及病原體等危險(xiǎn)材料不接受。

2、實(shí)驗(yàn)中涉及的堿基序列請(qǐng)以郵件的形式發(fā)到我中心。

3、實(shí)驗(yàn)中的使用載體要盡量提供背景資料: (質(zhì)粒大小， 抗性，拷貝數(shù)，多克隆位點(diǎn)等)如果是商品化載體，請(qǐng)您提供生產(chǎn)廠家及標(biāo)準(zhǔn)名稱;如果所提供載體是您自己構(gòu)建的請(qǐng)注明大體結(jié)構(gòu)情況。

4、我中心可以提供常用的如(氨芐青霉素，氯霉素，卡那霉素)以外的抗生素需您提供。

5、您自己提供的引物如果為干品，請(qǐng)您標(biāo)注具體的OD數(shù)，如果是液體態(tài)，請(qǐng)您標(biāo)明濃度。

6、可以用甘油菌和穿刺菌形式郵寄菌體。

(同時(shí)提供相應(yīng)的質(zhì)粒) ;如果提供質(zhì)粒，則質(zhì)粒的量建議在4ug以上;如果提供的是PCR產(chǎn)物，則PCR產(chǎn)物量建議好在5u以上(并附上電泳圖)

7、用于提取RNA/DNA的材料要新鮮。采樣時(shí)應(yīng)首先在液氮中速凍，保存在- 80度的冰箱中，使用干冰運(yùn)輸。

結(jié)果提供:

1、相關(guān)的實(shí)驗(yàn)說(shuō)明和相關(guān)的酶切圖片。

2、測(cè)序的結(jié)果。

3、構(gòu)建好的載體和菌液各-份。

4、如有鑒定的客戶提供PCR鑒定圖片。