抗凝裂解山羊血（無菌）

產(chǎn)品描述

山羊血清采集自正常健康的山羊供體，經(jīng)脂質(zhì)萃取和透析后儲存于緩沖液（0.01 M磷酸鈉，0.25 M氯化鈉, pH 7.6）中。常用于各種免疫實驗，起到封閉或?qū)φ盏淖饔谩?/span>

本品用于封閉的常見使用濃度為5%（v/v）。

產(chǎn)品使用

1）山羊血清是以凍干粉形式提供的，本品需要先溶解配制成100%原液后再稀釋使用。溶解方法：用10ml 蒸餾水（dH2O）充分溶解凍干粉（如果不澄清，可對其離心處理），此時得到的即是100%原液。然后按照1:20的比例用緩沖液，如PBS或PBST，稀釋到需要的5%工作液。也可以根據(jù)自身實驗條件，稀釋到合適的工作液濃度。

2）山羊血清以100%原液的形式提供，直接用合適的緩沖液稀釋到需要的工作液。

產(chǎn)品性質(zhì)

運輸與保存方法

冰袋運輸。凍干粉保存于2～8℃。100%原液保存于2～8℃，6個星期穩(wěn)定。建議原液分裝后置于≤-20℃，以延長保存期。重溶后100%原液的有效期1年。

注意事項

1）本品含，對人體有害，請注意適當防護。

2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

3）注意無菌操作

4）注意避免反復(fù)凍融。反復(fù)凍融可能產(chǎn)生沉淀，可以通過無菌條件下，3500rpm離心10min除去沉淀

常見問題

保存方法

血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。然而，若存放于4℃時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議將無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

解凍方法

將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。

避免產(chǎn)生沉淀物

1、解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法（-2℃至4℃至室溫），若血清解凍時改變的溫度太大（如-20℃至37℃），實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

2、解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

3、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。

4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟

5、若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。

若血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞過濾膜。

熱滅活

一般是以56℃，30分鐘來處理已解凍的血清，因為此加熱步驟，可以使補體去活化，而補體所參與的反應(yīng)有：溶細胞活性，平滑肌的收縮，肥大細胞和血小板組胺的釋放，增強吞噬作用，淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。

抗凝裂解山羊血（無菌）

鑒別方法

血清

血液凝固析出的淡黃色透明液體 。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。凝收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點是與血漿最大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中，血小板釋放出許多物質(zhì)，各也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如原變成，并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾，血液中許多化學(xué)成分的分析，都以血清為樣品。

血漿

血漿是血液的液體成分，血細胞懸濁于其中。人體含有2750-3300毫升血漿，約占血液總體積的55%。血漿的絕大部分是水（體積的90%），其中溶解的物質(zhì)主要是血漿蛋白，還包括葡萄糖、無機鹽離子、激素以及二氧化碳。血漿的主要功能是運載血細胞，同時也是運輸分泌產(chǎn)物的主要媒介。

將新鮮血液離心，使血細胞沉降，上層淡黃色清液即是血漿。血漿與血清的區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原等。

　正常山羊血清，來源于非免疫的山羊宿主，經(jīng)過脂質(zhì)萃取和含的PBS溶液透析，改善其透明度。推薦用PBS將封閉血清原液稀釋5-20倍，配成5%-20%的工作液，直接滴加在組織切片或者細胞涂片上，37℃度孵育10-30分鐘，清除血清，勿洗，滴加適當比例稀釋的一抗工作液，37℃孵育1-2h或4℃過夜。注意：封閉用血清中不能含有目標蛋白，且與一抗來源不同，可用與二抗相同來源的封閉血清。