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曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)
- 公司名稱 上海晨曄生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/12/17 11:29:07
- 訪問次數(shù) 156
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產(chǎn)地類別 | 國產(chǎn) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 綜合 |
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一、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)設(shè)備、材料和設(shè)置
1.1. 飼養(yǎng)的房間
隔離聲音和不經(jīng)意間的干擾。如果有環(huán)境噪音變化的擔(dān)憂,可以使用白噪音機(jī)器(例如,白噪音發(fā)生器,San Diego Instruments,San Diego, CA, USA 或者聲音療法機(jī)器,Conair Corporation, Glendale, AZ, USA)。
曠場(chǎng)保持一致的照明。如在“實(shí)驗(yàn)變量”中討論的,不同的研究者使用的照明量差異很大,可以是紅色或白色。作為經(jīng)驗(yàn)法則,我們的實(shí)驗(yàn)室通常使用大約30勒克斯的暗光。更亮的光(尤其是更亮的白光)可能會(huì)增加觸墻性和/或減少運(yùn)動(dòng),但在明亮的環(huán)境中進(jìn)行測(cè)試并不少見。無論選擇何種光線級(jí)別,研究者都應(yīng)使用光度計(jì)記錄光線級(jí)別,并在任何出版物中報(bào)告此級(jí)別。
1.2. 曠場(chǎng)的材料
一般使用塑料或耐腐蝕金屬更可取,因?yàn)檫@些材料可以輕松清潔和消毒。大小可以大不相同(小鼠推薦至少40 * 40厘米的大?。?。墻高應(yīng)至少為40厘米。這個(gè)高度既限制了老鼠看到墻外的能力,也通常足夠高,除非在情況下,可以防止老鼠跳出曠場(chǎng)。通常大鼠的曠場(chǎng)是100cm*100cm*40cm,小鼠曠場(chǎng)為50cm*50cm*40cm,如果使用頂部視頻跟蹤系統(tǒng),考慮使用啞光地板以防止反射。
1.2 曠場(chǎng)的材料
一般使用塑料或耐腐蝕金屬更可取,因?yàn)檫@些材料可以輕松清潔和消毒。大小可以大不相同(小鼠推薦至少40 * 40厘米的大?。Ω邞?yīng)至少為40厘米。這個(gè)高度既限制了老鼠看到墻外的能力,也通常足夠高,除非在情況下,可以防止老鼠跳出曠場(chǎng)。通常大鼠的曠場(chǎng)是100cm*100cm*40cm,小鼠曠場(chǎng)為50cm*50cm*40cm,如果使用頂部視頻跟蹤系統(tǒng),考慮使用啞光地板以防止反射。
1.3. 獲取數(shù)據(jù)的方法
將曠場(chǎng)地被劃分為不同的區(qū)域(圖1.1)。更常見的是在配備有光電池的曠場(chǎng)中進(jìn)行測(cè)試,或者動(dòng)物被計(jì)算機(jī)化跟蹤軟件監(jiān)控。
1.1
1.4. 計(jì)時(shí)器 這可以由設(shè)備或數(shù)字跟蹤軟件自動(dòng)化,也可以是單獨(dú)的手持計(jì)時(shí)器。
1.5. 測(cè)試后的新鼠籠
通常,將老鼠放入新籠子比放回原飼養(yǎng)籠那里更可取,因?yàn)橹匦乱肜鲜罂赡軙?huì)修改尚未測(cè)試的老鼠的行為。
1.6. 清理材料
通常包括一個(gè)垃圾桶和紙巾來清理尿液和擦拭曠場(chǎng)。一個(gè)小而安靜的手持式吸塵器通常很適合清除緊湊的糞便。
1.7. 消毒劑 一個(gè)裝有10-70%酒精的噴霧瓶可以用于一般擦拭。注意,酒精應(yīng)謹(jǐn)慎使用,因?yàn)樗赡軙?huì)導(dǎo)致許多塑料裂紋,并溶解用于將塑料和其他材料粘合在一起的膠水。
二. 實(shí)驗(yàn)流程
任何類型的新奇環(huán)境或壓力都可能改變探索行為。因此,需要減少新奇環(huán)境,例如籠子的變化。
對(duì)于測(cè)試前的一段時(shí)間至關(guān)重要,通常至少24小時(shí)。同樣重要的是,所有要在一組內(nèi)進(jìn)行比較的動(dòng)物在其實(shí)驗(yàn)中都以相同的方式處理。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),老鼠可能只被測(cè)試一次或多次以評(píng)估對(duì)濫用藥物的適應(yīng)性或敏感性。OFT通常在5或10分鐘內(nèi)進(jìn)行。如果是自動(dòng)化的行為學(xué)分析系統(tǒng),允許動(dòng)物在任何一個(gè)時(shí)間點(diǎn)在多個(gè)曠場(chǎng)中單獨(dú)測(cè)試。
2.1 在測(cè)試前至少1小時(shí)將老鼠運(yùn)送到測(cè)試室,讓老鼠適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。如果轉(zhuǎn)移涉及到環(huán)境變化過大或其他可能的壓力源,這個(gè)時(shí)間段應(yīng)該延長(zhǎng)。
2.2 打開視頻攝像機(jī)、光電檢測(cè)設(shè)備或其他跟蹤系統(tǒng)。注意,無論使用何種數(shù)據(jù)采集方法,好的做法是使用視頻攝像機(jī)記錄每個(gè)會(huì)話。這樣,如果有必要,可以在以后的時(shí)間重新評(píng)估會(huì)話的結(jié)果。
2.3 清潔曠場(chǎng)地(OF)。即使在初始試驗(yàn)之前曠場(chǎng)地并不臟,清潔也很重要,這樣所有的動(dòng)物都能平等地體驗(yàn)到消毒劑的殘留氣味。
2.4 將老鼠放入曠場(chǎng)地。最常見是將老鼠放在靠近墻壁的地方,這是因?yàn)檫@樣不會(huì)立即將老鼠暴露在壓力情境(曠場(chǎng)地的中心)中,或者因?yàn)檫@樣可能更容易到達(dá)(在曠場(chǎng)地面積大的情況下)。
2.5 啟動(dòng)計(jì)時(shí)器。
2.6測(cè)試者應(yīng)該離開房間,或者盡可能遠(yuǎn)離曠場(chǎng)和老鼠的視線。在每次試驗(yàn)中,測(cè)試者應(yīng)保持靜止和安靜。
2.7在試驗(yàn)結(jié)束時(shí),將老鼠從曠場(chǎng)中移出,并放入新的籠子。
2.8計(jì)數(shù)糞便。如前所述,糞便的數(shù)量與動(dòng)物的情緒或焦慮狀態(tài)有關(guān)。糞便數(shù)量的增加與其他焦慮度量相關(guān)。
2.9用消毒劑清潔曠場(chǎng)地(如果使用了吸塵器的話)。
2.10在將下一只老鼠放入曠場(chǎng)地之前,等待消毒劑干燥。
三、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)測(cè)試指標(biāo)
通常最有用的結(jié)果是
移動(dòng)的距離(無論是真實(shí)距離測(cè)量還是相對(duì)單位)
移動(dòng)的時(shí)間
在中心的時(shí)間
在四周的時(shí)間
四周與中心時(shí)間的比例
垂直活動(dòng)和糞便
通常,計(jì)算這些輸出在整個(gè)時(shí)間段(例如,總移動(dòng)距離),并根據(jù)測(cè)量,也分為時(shí)間區(qū)間。例如,每5分鐘移動(dòng)的距離是呈現(xiàn)和分析數(shù)據(jù)的常見方法。實(shí)驗(yàn)的主要結(jié)果通常被視為連續(xù)變量,并根據(jù)比較的組數(shù)或?qū)嶒?yàn)條件的數(shù)量,使用t檢驗(yàn)或方差分析(ANOVA)進(jìn)行分析。分箱數(shù)據(jù)(例如,1小時(shí)內(nèi)每5分鐘移動(dòng)的距離)應(yīng)通過兩因素ANOVA進(jìn)行分析,時(shí)間為一個(gè)因素,處理(或基因型等)為另一個(gè)因素。