我們深知每個項目背后的特別需求和挑戰(zhàn),因此致力于提供高品質(zhì)定制化的科研服務(wù),滿足您個性化的科研需求。
Absin可以提供全面的定制服務(wù)包括:
大分子定制: 多肽/蛋白/抗體定制;線性/環(huán)狀mRNA定制;
類器官技術(shù): 類器官定制服務(wù);類器官技術(shù)培訓(xùn)班;類器官平臺搭建服務(wù);
免疫學(xué)服務(wù): ELISA檢測服務(wù);多重熒光免疫組化服務(wù);
其他定制與服務(wù):化合物/酶/抗體/蛋白標記服務(wù);抗體/蛋白純化服務(wù);血清定制等。
定制案例一:用于WB/IP/IHC/FC/ELISA等實驗的多抗制備
1、抗原設(shè)計
1)客戶提供正確的NCBI號或蛋白序列;
2)技術(shù)工程師進行抗原設(shè)計。
圖1 抗原性質(zhì)分析圖
2、抗原制備
原核表達可溶蛋白/化學(xué)合成抗原多肽。
3、抗體制備
1)動物免疫:每個抗原免疫2只兔子;
2)抗體純化:動物處死,取血;抗原親和純化抗體;
3)抗體驗證:ELISA驗證。
4、數(shù)據(jù)準備和發(fā)貨
1)數(shù)據(jù):抗體制備流程及數(shù)據(jù)、抗體說明書、可溶蛋白SDS-PEAG/多肽合成的HPLC和MS報告;
2)發(fā)貨:抗原親和純化抗體(大于5mg);若客戶需要可提供抗原蛋白0.5mg/目的多肽。
定制案例二:化合物/酶/抗體/蛋白標記服務(wù)
Absin可以提供多種常見熒光素標記服務(wù),體系成熟,目前常規(guī)染料標記周期1-2周。需要注意的是標記會產(chǎn)生損耗,量越小的情況損耗越大,為盡量減少損耗,我們建議您至少100ug起標。
化合物標記流程:
圖2
我們會根據(jù)化合物的結(jié)構(gòu)給出相應(yīng)的標記建議:
如生物素標記七葉皂苷A:
圖3
標記建議:
生物素可以合成在該結(jié)構(gòu)的羥基上,但是由于多個羥基活性近似,所以會出現(xiàn)多個羥基被結(jié)合上生物素的情況。最終合成產(chǎn)物不單一,需要老師確定這種不可避免的情況能否滿足實驗需求。
定制案例三:蛋白表達及純化服務(wù)
客戶提供模板或全基因合成基因模板,經(jīng)過跨膜區(qū)預(yù)測、抗原性質(zhì)分析、可能的蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測后給出蛋白表達建議。
圖4 可能的蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測
評估蛋白整體性質(zhì),若蛋白整體性質(zhì)較好,則可以進行純化流程:
1、擴增克隆到原核可溶表達載體中,測序;
2、小試表達測試,SDS-PAGE;
3、如有表達,進行大規(guī)模表達;
4、蛋白純化,SDS-PAGE;
5、透析,SDS-PAGE,保存。
抗體定制常見問題解答
Q1:如何確定選擇單抗還是多抗定制?
A1:單抗是一個B細胞克隆產(chǎn)生的針對一種抗原表位的的單一抗體;多抗是多個B細胞克隆產(chǎn)生的針對多種抗原表位的多種抗體混合物。對抗體特異性要求高,用量較大,需要長期使用一致的抗體,一般選擇單抗(如WB/IP/IF/ICC等)。對抗體的特異性要求不高,需要做沉淀和凝集反應(yīng)的檢測性實驗或者只需做ELISA檢測,一般選擇多抗。
Q2:定制的抗體沒有找到參考文獻,有推薦的使用濃度嗎?
A2:我們一般推薦先用1:1000做預(yù)實驗,根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果,調(diào)整抗體使用濃度。另外,即使有參考文獻,由于實驗設(shè)備、操作體系等因素的影響可能會有所差異,建議老師結(jié)合自己的實驗做下測試,以達到最佳的實驗使用效果。
Q3:小鼠腹水得到的抗體和小鼠血清有交叉反應(yīng)正常嗎?純化后是否可以解決這個問題?
A3:從小鼠腹水中得到的抗體肯定會對小鼠血清有親和性,出現(xiàn)交叉反應(yīng)屬于正?,F(xiàn)象??梢酝ㄟ^抗原親和純化得到特異性的抗體,能夠較好改善交叉反應(yīng)的現(xiàn)象。但由于純化效率不可能達到100%,因此不能保證消除。
好消息!Absin文獻獎勵重磅升級!
Absin特色產(chǎn)品線:
WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;激動劑/抑制劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒;呼吸爆發(fā)試劑盒;ELISA試劑盒;重組蛋白;抗體: 二抗、標簽抗體、對照抗體;定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...
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