薄層色譜儀的以下原理你了解么
薄層色譜儀是一種用于分離和檢測(cè)化合物的儀器。它基于薄層色譜技術(shù),通過將樣品溶液放置在一個(gè)均勻、細(xì)致地覆蓋在玻璃或塑料板上的吸附材料(如硅膠)上,并使用移動(dòng)相沿著這個(gè)吸附材料表面逐漸進(jìn)行分離。
薄層色譜又叫薄板層析,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù),屬固—液吸附色譜,它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點(diǎn),一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時(shí),把吸附層加厚加大,因此,又可用來精制樣品,此法適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的質(zhì)。此外,薄層色譜法還可用來跟蹤有機(jī)反應(yīng)及進(jìn)行柱色譜之前的一種“預(yù)試”。
薄層掃描儀是可以對(duì)斑點(diǎn)進(jìn)行掃描的專用分光光度計(jì),用可見光或紫外光作光源,線性掃描或鋸齒掃描薄層板展開后的斑點(diǎn),該斑點(diǎn)就吸收該組分特征波長(zhǎng)的單色光,剩余的單色光經(jīng)透射或反射或發(fā)射熒光,由檢測(cè)器積分起來,獲得這塊斑點(diǎn)面積的待測(cè)物質(zhì)含量。
工作原理:
通常情況下,我們先選擇一小片經(jīng)過特殊處理后的質(zhì)量較好、耐酸堿性強(qiáng)并且具有良好抗靜電能力等性能好的硅膠G薄層板,并滴入待測(cè)試混合物到其一個(gè)端部中央?yún)^(qū)域位置處。之后,在梳形樣線起始點(diǎn)處加入移動(dòng)相(即流體載體),使其從初始點(diǎn)開始延伸至另外一個(gè)端部位置。
隨著時(shí)間推進(jìn),樣品成分在吸附材料表面不斷地向前遷移并與流動(dòng)相發(fā)生交互反應(yīng)。由此可以根據(jù)每種組分所對(duì)應(yīng)出現(xiàn)條帶長(zhǎng)度及顏色差異比較來確定其含量大小以及純度程度等信息。而且可采用多種定性以及定量手段(如顯微鏡、紫外分光等)來進(jìn)一步確認(rèn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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