三用臺式紫外分析儀(通常是紫外-可見分光光度計,UV-Vis分光光度計)的標準操作規(guī)程(SOP)包括了從設(shè)備開機、校準到實際測量的各個環(huán)節(jié),確保每次分析的準確性和可靠性。以下是一般三用臺式紫外分析儀的標準操作規(guī)程,具體操作可能因儀器型號、廠家不同而有所差異。
一、儀器準備與檢查
檢查設(shè)備
檢查紫外分析儀的電源是否正常。
確保光源(如氙燈、氙燈或鎢燈)完好無損。
檢查光學(xué)系統(tǒng)是否清潔、鏡頭是否干凈。
確保樣品池、比色皿干凈無污染。
電源開關(guān)
打開電源開關(guān),啟動儀器。部分儀器需要預(yù)熱,等待儀器自檢和穩(wěn)定。
選擇分析模式
根據(jù)需要選擇合適的分析模式(如紫外掃描、可見掃描、定量分析等)。
設(shè)置合適的波長范圍(如200nm至800nm,具體取決于待測物質(zhì)的吸收特征)。
二、樣品準備
樣品制備
按照實驗需求,準備待測樣品。如果是溶液,需確保溶液無氣泡且均勻。
配制標準溶液或比色標準品,確保其濃度符合測量范圍。
比色皿的使用
選擇適合的比色皿(如1cm光程的玻璃或石英比色皿),清潔比色皿并確保沒有污漬、劃痕或裂縫。
清潔比色皿時使用無纖維的清潔布,或用適當?shù)娜軇ㄈ缯麴s水、乙醇等)清洗,避免使用可能影響光透過率的清潔劑。
空白樣品設(shè)置
使用溶劑(如蒸餾水或溶液)作為空白樣品,放入比色皿,并確保其不受污染。
空白樣品的測量結(jié)果用于校準儀器,去除溶劑背景的影響。
三、儀器校準與調(diào)試
波長校準
根據(jù)儀器說明書進行波長校準。一般通過使用標準物質(zhì)(如苯甲酸、氯化鈉等)進行波長準確性校準,確認儀器的波長準確性。
調(diào)整波長至實驗要求,通常采用標準物質(zhì)的吸收峰進行調(diào)校。
吸光度零點校準
使用空白溶液或溶劑調(diào)整儀器的零點,確保在沒有樣品的情況下,儀器顯示為0吸光度。
儀器預(yù)熱
開啟儀器后,需要預(yù)熱一定時間(一般為10-15分鐘)直到儀器穩(wěn)定。
四、測量過程
樣品測量
將樣品溶液(或標準溶液)裝入清潔的比色皿中,并確保比色皿放置正確、無氣泡。
將比色皿置于樣品室內(nèi),調(diào)整光束路徑,確保樣品對準光束。
設(shè)置測量參數(shù)
設(shè)置合適的波長范圍、掃描速度、積分時間等,具體取決于實驗需求。
選擇合適的掃描模式(如單次掃描、連續(xù)掃描等)。
數(shù)據(jù)記錄
開始測量后,儀器會自動記錄吸光度或透過率,并生成相應(yīng)的吸收光譜圖。
根據(jù)需要保存實驗數(shù)據(jù)和光譜圖。
樣品數(shù)據(jù)分析
在儀器顯示屏或計算機軟件中查看測量結(jié)果。對于定量分析,依據(jù)比爾定律(A=εcl)進行濃度計算。
對于多波長掃描的樣品,可以識別特征吸收峰,并進行數(shù)據(jù)處理或峰值比對。
五、清潔與關(guān)機
儀器清潔
每次實驗結(jié)束后,使用適當?shù)那鍧嵎椒ㄇ逑幢壬蠛蜆悠烦亍?nbsp;
用無塵布擦拭儀器外殼、顯示屏等,確保設(shè)備清潔。
關(guān)機
完成分析后,先關(guān)閉測量軟件,再關(guān)掉儀器電源。對于有預(yù)熱時間的儀器,可能需要稍作延遲后關(guān)閉。
斷開電源,確保儀器處于待機或關(guān)閉狀態(tài)。
六、常見注意事項
樣品濃度控制
樣品濃度不宜過高,否則會導(dǎo)致光路吸收過多光,影響測量結(jié)果。通常在0.1到1.0的吸光度范圍內(nèi)效果佳。
避免污染
在操作過程中避免樣品與容器、比色皿、光學(xué)元件的接觸污染。
定期檢查比色皿,發(fā)現(xiàn)有劃痕或損壞時,及時更換。
溫度與濕度
確保實驗環(huán)境的溫度和濕度適宜,不好的條件可能影響儀器的穩(wěn)定性及測量結(jié)果的精度。
七、數(shù)據(jù)處理與報告
數(shù)據(jù)分析
根據(jù)測量結(jié)果生成數(shù)據(jù)報告,進行定量或定性分析。
對于定量分析,可以使用標準曲線法進行濃度計算,或通過比爾定律計算吸光度和濃度之間的關(guān)系。
報告保存
保存數(shù)據(jù)文件并進行備份,確保實驗數(shù)據(jù)的完整性和可追溯性。
總結(jié)
三用臺式紫外分析儀的標準操作規(guī)程涉及儀器的檢查、樣品準備、校準、測量以及數(shù)據(jù)分析等多個環(huán)節(jié)。操作人員需按照規(guī)范進行每一步驟,確保分析結(jié)果的準確性和儀器的穩(wěn)定性。在實際使用中,還需根據(jù)具體儀器型號和實驗要求靈活調(diào)整相關(guān)參數(shù)和操作細節(jié)。
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